在《蜘蛛宇宙》中，有多个来自不同平行宇宙的蜘蛛侠角色，以下是一些主要人物：
迈尔斯·莫拉莱斯（Miles Morales）
他是《蜘蛛宇宙》系列的主角，也是终极世界的第二任蜘蛛侠。迈尔斯在皮特·帕克（Peter Parker）死后，潜入奥斯本公司被一只蜘蛛咬伤获得了超能力。
彼得·B·帕克（Peter B. Parker）
在《蜘蛛宇宙》中，彼得·帕克在第一部中是迈尔斯的心灵导师，在第二部则转变为无比宠爱女儿的奶爸。他原本是另一个宇宙的蜘蛛侠，因意外被一只受过放射性感染的蜘蛛咬伤而获得了超能力。
米格尔·奥哈拉（Miguel O'Hara）
他是《蜘蛛宇宙：跨越宇宙》的主要反派，并会在即将推出的第三部作品中有重要戏份。米格尔·奥哈拉在自己的宇宙里被咬后成为了蜥蜴博士，并在《蜘蛛宇宙》中扮演重要角色。
格温·史黛西（Gwen Stacy）
格温在《蜘蛛宇宙》中继承了她父亲的贫穷和生活混乱，并在皮特·帕克死后成为了蜘蛛女侠。她是少数的女性蜘蛛侠之一，深受许多粉丝喜爱。
暗影蜘蛛侠（Shadow Spider-Man）
暗影蜘蛛侠是30年代经济萧条背景下产生的角色，他十分神秘，能力比终极蜘蛛侠差，但为人卑鄙，喜欢用蜘蛛丝拿别人的武器反击。他的本叔叔因为领导罢工被商人杀害，他在失落中走进了一家工厂，被一只蜘蛛咬伤获得了能力。
蜘猪侠（Spider-Ham）
蜘猪侠是《蜘蛛侠：平行宇宙》中的一个搞笑角色，他是彼得·帕克的猪猪朋友，被放射性蜘蛛咬伤后获得了超能力。
蜘蛛侠2099（Spider-Man 2099）
蜘蛛侠2099是上世纪90年代早期漫威漫画中“2099”系列的一部分，他来自未来时空，比彼得·帕克更加饱受磨难。
蜘蛛女侠（Spider-Woman）
蜘蛛女侠是格温·史黛西在另一个宇宙中的身份，她继承了蜘蛛侠的能力和贫穷的生活混乱。
徘徊者（Prowler）
徘徊者是迈尔斯·莫拉莱斯在1610宇宙中的叔叔，被金并杀死后成为了迈尔斯的Uncle Ben。
这些角色在《蜘蛛宇宙》中各自扮演了重要的角色，共同构建了一个丰富多彩的平行宇宙世界。
